laporan praktikum Biokimia : PENENTUAN KADAR GLUKOSA URINE

PENENTUAN KADAR GLUKOSA URINE

Penanggung Jawab     : Hajar Tarwiyah

Anggota                      : Ina Sholihah

Ranisha

I.       Tujuan

Untuk menentukan kadar glukosa dalam urine

II.    Prinsip

CuSO₄ alkalis dalam benedict kuantitatif direduksi oleh glukosa. CuO yang terbentuk akan bereaksi dengan KSCN membentuk presipitat putih keruh yang mencegah terjadinya endapan warna kuning atau merah. Bila CuSO4 telah habis maka warna biru akan hilang dan menjadi jernih.

III. Tinjauan pustaka

Tes glukosa urin dapat dilakukan dengan menggunakan reaksi reduksi, dikerjakan dengan menggunakan fehling, benedict, dan clinitest. Ketiga jenis tes ini dapat digolongkan dalam jenis pemeriksaan semi kuantitatif. Sedangkan tes glukosa dengan enzimatik dilakukan dengan metode carik celup yang tergolong dalam pemeriksaan semi kuantitatif dan kuantitatif. ( kimball, 1998 )

Diabetes adalah suatu penyakit yang dapat dideteksi melalui urin. Urin penderita diabetes akan mengandung gula yang tidak akan ditemukan dalam urin orang yang sehat. Untuk menyatakan keberadaan suatu glukosa, dapat dilakukan dengan cara yang berbeda – beda. Cara yang tidak spesifik dapat dilakukan dengan menggunakan suatu zat dalam reagen yang berubah sifat dan warnanya jika direduksi oleh glukosa. Diantaranya adalah penggunaan reagen fehling yang dapat dipakai untuk menyatakan adanya reduksi yang mengandung garam cupri. Sedangkan pembuktian glukosuria secara spesifik dapat dilakukan dengan menggunakan enzim glukosa oxidase. ( Probosunu, 1994 )

Pada orang normal tidak ditemukan adanya glukosa dalam urine. Glukosuria dapat terjadi karena peningkatan kadar glukosa dalam darah yang melebihi kapasitas maksimum tubulus untuk mereabsorbsi glukosa. Hal ini dapat ditemukan pada kondisi diabetes melitus, tirotoksis, sindroma chusing, phaeochromocytoma, peningkatan tekanan intrakranial atau karena ambang rangsang ginjal yang menurun seperti pada renal glukosuria kehamilan dan sindroma fanconi. Namun reduksi positif tidak selalu berarti pasien menderita diabetes melitus. Hal ini dikarenakan pada penggunaan cara reduksi dapat terjadi hasil positif palsu pada urin yang disebabkan karena adanya kandungan bahan reduktor selain glukosa. Bahan reduktor yang dapat menimbulkan reaksi positif palsu tersebut antara lain : galaktosa, fruktosa, laktosa, pentosa, formalin, glukuronat dan obat – obatan seperti streptomycin, salisilat dan vitamin C. Oleh karena itu, perlu dilakukan uji lebih lanjut untuk memastikan jenis gula pereduksi yang terkandung dalam sampel urine. Hal ini dikarenakan hanya kandungan glukosa yang mengidentifikasi keberadaan penyakit diabetes. Penggunaan cara enzimatik lebih sensitif dibandingkan dengan cara reduksi. Cara enzimatik dapat mendeteksi kadar glukosa urin sampai 100mg/dL, sedangkan pada cara reduksi hanya sampai 250 mg/dL. Nilai ambang ginjal untuk glukosa dalam keadaan normal adalah 160 – 180 mg%. ( Montgomery, 1993 )

Faktor – faktor yang mempengaruhi jumlah atau keadaan urine yaitu diantaranya jumlah air yang diminum, keadaan sistem syaraf, hormon ADH, banyaknya garam yang harus dikeluarkan dari darah agar tekanan menjadi osmotic, pada penderita diabetes melitus pengeluaran glukosa diikuti kenaikan volume urine. ( Thenawijaya, 1995 )

IV. Alat dan Bahan

1.   Alat

a.    Beaker gelas

b.    Tabung reaksi

c.    Rak tabung reaksi

d.   Batu didih

e.    Bunsen

f.     Pengaduk

g.    Pipet tetes

h.    Mikropipet

2.   Bahan

a.    Urine                  10 ml

b.    Reagen benedict            10 ml

c.    Na₂CO₃              2 gram

V.    Cara kerja

a.   Kualitatif

Pipet 5 ml reagen benedict ke dalam tabung reaksi

Tetesi 4 – 8 tetes urine

Masukkan tabung reaksi dalam air mendidih selama 5 menit

Angkat dan kocok tabung

Baca perubahan warna yang terjadi

·  Penilaian

( - )       = tetap biru jernih / sedikit kehijauan dan agak keruh.

( + )        = hijau kekuningan dan agak keruh ( 0,5 – 1 % glukosa )

( ++ )     = kuning keruh ( 1 – 1,5 glukosa )

( +++ )   = jingga / warna lumpur keruh ( 2 – 3 % glukosa )

( ++++ ) = merah keruh ( 73,5 % glukosa )

b.   Cara kuantitatif

Pipet 5 ml reagen benedict ke dalam tabung reaksi

Tambahkan 2 gram Na₂CO₃ dan 2 butir batu didih

Panaskan di atas bunsen sambil digoyang – goyangkan sampai mendidih

Titrasi larutan yang telah diencerkan sedikit demi sedikit sampai warna biru hilang

Catat volume urine yang digunakan untuk titrasi

Hitung kadar glukosa urine.

·           Rumus = 2 x pengenceran

                        Volume titrasi urin

·           Pengenceran urine didasarkan pada hasil uji kualitatif.

bila urine hasil kualitatif = - Hijau pengenceran          1 : 2

                                             -kuning pengenceran       1 : 5

                                            - merah pengenceran        1 : 10

VI.   Hasil pengamatan

a.    Hasil pengamatan kualitatif

Sampel	Perlakuan	Hasil perubahan warna
Urine C	Dipipet 5 ml reagen benedict ke dalam tabung reaksi	biru
	Ditetesi 4 – 8 tetes urine	biru
	Dimasukkan ke dalam air mendidih selama 5 menit	biru
	Diangkat dan dibaca hasilnya	hijau kekuningan

Pengenceran urine

Sampel	Perlakuan	Hasilperubahan warna
Urine C	Dipipet 2 ml urine ke dalam tabung reaksi	kuning muda
	Ditambahkan 4 ml aquades	kuning muda

b.    Hasil pengamatan kuantitatif

Sampel	Perlakuan	Hasil perubahan warna
Urine C	Dipipet 5 ml reagen benedict ke dalam tabung reaksi	biru
	Ditambahkan 2 gram Na2CO3 dan 2 butir batu didih	biru
	Dipanaskan dan digoyang – goyangkan hingga mendidih	biru
	Dititrasi dengan larutan yang sudah diencerkan	warnanya pudar
	Dicatat volume urine yang digunakan untuk titrasi	didapatkan hasil 4 ml
	Dihitung kadarnya	Hasil kadar glukosa = 2 %

Hasil pengamatan kadar glukosa secara kualitatif dan kuantitatif

Kelompok	Sampel urine	Uji kualitatif		Uji kuantitatif
		Warna	Nilai	mL titrasi	Kadar
1	A	Biru ( - )	0	-	-
2	A	Hijau keruh ( + )	0,5 - 1	3,7	1,62
3	A	Hijau keruh ( + )	0,5 – 1	6	0,66
4	B	Hijau  ( + )	0,5 – 1	7,5	0,53
5	B	Hijau ( + )	0,5 – 1	6	0,66
6	B	Biru ( - )	0	-	-
7	C	Hijau keruh ( + )	0,5 – 1	3,2	1,25
8	C	Hijau keruh ( + )	0,5 – 1	3	1,3
9	C	Hijau keruh ( + )	0,5 – 1	4	2
10	D	Biru ( - )	0	-	-
11	D	Biru jernih ( - )	0	-	-

VII.Pembahasan

Pada praktikum kali ini, kami mencoba menentukan kadar glukosa urine dengan menggunakan benedict. Mula – mula kami melakukan uji kualitatif urine yang dikeluarkan dengan meneteskan 4 sampai 8 tetes urine ke dalam 5 ml reagen benedict dan memasukkannya ke dalam air mendidih kurang lebih selama 5 menit, setelah itu mengangkat tabung reaksi dan membaca hasilnya. Pada kelompok kami ( sembilan ) hasil yang didapatkan adalah warna pada tabung reaksi berubah menjadi hijau keruh. Hal ini  menunjukkan bahwa sampel urine yang kami pakai ( urine C ) mengandung glukosa. Ditinjau dari perubahan warna, urine yang tidak mengandung glukosa akan berwarna tetap ( biru jernih ).

Untuk mengetahui kadar glukosa dalam urine, setelah melakukan pengamatan secara kualitatif selanjutnya yakni melakukan pengamatan secara kuantitatif. Awal mula yang dilakukan adalah dengan memipet 5 ml reagen benedict dan menambahkan 2 gram Na₂CO₃ dan 2 buah batu didih ke dalam tabung reaksi dan memanaskannya diatas bunsen hingga mendidih lalu menitrasinya dengan urine yang telah diencerkan dan menghitung volume dari titrasi tersebut. Kelompok kami ( sembilan ) mendapatkan hasil 4 mL, dengan kadar glukosa 2 % yang dihitung dengan rumus

2

 2 x pengenceran  =    2 x 4

                         Volume titrasi             4

 CuSO₄ alkalis dalam benedict kuantitatif direduksi oleh glukosa.

Urin dibentuk oleh ginjal dalam menjalankan sistem homeostatic. Sifat dan susunan urin dipengaruhi oleh faktor fisiologi ( misalkan masukkan diet, berbagai proses dalam tubuh, suhu, lingkungan , stress, mental dan fisik ) dan faktor patologis ( seperti pada gangguan metabolisme ,misalnya diabetes melitus dan penyakit ginjal ). Oleh karena itu pemeriksaan urin berguna untuk menunjang diagnosis suatu penyakit. Pada penyakit tertentu, dalam urin dapat ditemukan  zat – zat patologik antara lain glukosa, protein dan keton ( Probosunu, 1994 )

VIII.  Kesimpulan

Dari hasil pengamatan kelompok kami ( sembilan ), kami mendapatkan sampel urine C. Pada saat uji kualitatif warna urine menjadi hijau keruh yang artinya urine tersebut mengandung glukosa. Dan dari uji kuantitatif kami mendapatkan kadar glukosa dalam urin sebesar 2 %.